Сумарні антитіла к віч 1 2. Визначення ДНК кандиду альбіканс (Candida albicans) у відокремлюваному (зіскобі) з цервікального каналу методом ПЛР, якісне дослідження. Показання для призначення аналізу крові на ВІЛ

Вирішальне значення у постановці діагнозу ВІЛ-інфекції відіграє лабораторна діагностика, яка полягає у виявленні АТ до ВІЛ у крові методом ІФА з подальшим підтвердженням позитивних результатів методом ІХ. Такий метод діагностики ВІЛ-інфекції дає змогу виявляти ВІЛ-інфікованих осіб з ефективністю 99%.

Показання до застосування різних лабораторних досліджень та особливості інтерпретації результатів

В даний час для скринінгового етапу діагностики ВІЛ-інфекції використовуються набори реагентів третього та четвертого поколінь, що базуються на методі ІФА. Відмінною рисою тестів четвертого поколінняє можливість одночасного виявлення АГ (p24) та сумарних АТ, у той час як тести третього покоління дозволяють визначати лише АТ. По можливості, перевага має надаватися тестам четвертого покоління, зважаючи на їх вищу діагностичну чутливість і можливість виявлення інфекції в осіб у період серологічного вікна.

Негативний результат при виявленні АТ до ВІЛ методом ІФА не завжди свідчить про відсутність зараження. Серйозну проблему представляють випадки, коли тест проведено період серологічного вікна, тобто. у перші тижні після зараження, коли ще не виробилися у достатній кількості АТ до ВІЛ. В окремих осіб період серологічного вікна може тривати кілька місяців, тому за наявності даних, які свідчать про контакт із інфікованими ВІЛ, зазвичай проводять повторні дослідження через 2–3 місяці. Помилково-негативні результати виявлення АТ до ВІЛ при використанні ІФА можуть бути отримані в термінальній стадії хвороби, що характеризується важким ураженням імунної системи з глибоким порушенням процесу утворення АТ.

Позитивний результат виявлення АТ методом ІФА вказує на ймовірність зараження ВІЛ-інфекцією, але іноді цей результат може бути хибнопозитивним, наприклад, за наявності у людини пухлин, алергічних захворювань, під час вагітності, при аутоімунних захворюваннях, суттєвих змінах показників біохімічного дослідження крові, ряді хронічних захворювань. У таких випадках потрібні додаткові дослідження в експертній лабораторії.

У разі отримання позитивного результату виявлення АТ до ВІЛ методом ІФА потрібне його підтвердження. На першому етапі підтвердження аналіз повторюють у тій же тест-системі у двох лунках – це дозволяє виключити технічні помилки. Якщо результат підтвердився, визначення АТ методом ІФА у сироватці пацієнта повторюють, використовуючи два референтні набори реагентів. Якщо хоча б в одному з таких досліджень отримано позитивний результат, роблять третю стадію підтвердження: дослідження методом ІБ, що дозволяє виявити АТ до окремих ВІЛ-білків-антигенів.

Результати, отримані методом ІБ, інтерпретуються як позитивні, сумнівні та негативні. Негативними (негативними) вважають результати, якщо у досліджуваній сироватці не виявлено АТ до жодного з АГ ВІЛ або є слабка реакція з білком р17. Найбільш вагомою основою для позитивної реакції є виявлення АТ до білків оболонки ВІЛ (глікопротеїдів gp41, gp120, gp160). Результат вважається позитивним у разі виявлення АТ до будь-яких двох глікопротеїдів ВІЛ. За наявності реакції тільки з одним із білків оболонки, у поєднанні з реакцією з іншими білками або без неї, результат вважається сумнівним, у цьому випадку рекомендується провести дослідження для виявлення артеріальної гіпертензії р24 або ДНК/РНК ВІЛ. Якщо виявлено АГ р24 або ДНК/РНК ВІЛ, повторне обстеження з використанням ІБ проводиться через 2 тижні після отримання першого невизначеного результату і надалі через кожні 2 тижні до отримання позитивного результату підтверджуючого тесту. Якщо через 6 місяців після першого обстеження знову будуть отримані невизначені результати, а у пацієнта не будуть виявлені фактори ризику зараження та клінічні симптоми ВІЛ-інфекції, результат розцінюється як хибнопозитивний.

Нерідко після 1-3-6 місяців з моменту отримання сумнівного результату в сироватці крові з'являються одне за одним АТ до всіх АГ ВІЛ. У цьому випадку сумнівний результат – свідчення початковій стадіїВІЛ-інфекції. У ряді випадків сумнівні результати ІБ спостерігаються у неінфікованих осіб, в організмі яких є АТ, схожі на справжні АТ до ВІЛ.

Однією з непрямих ознак ВІЛ-інфекції є вибіркове зменшення CD4+ Т-клітин хелперів у зв'язку з тим, що ВІЛ має тропність до клітинного рецептора CD4. Однак ці зміни можуть бути відсутніми на певних стадіях ВІЛ-інфекції, мати індивідуальні коливання у різних пацієнтів, а також зустрічатися при інших захворюваннях. Так, у дорослих пацієнтів, які перебувають у латентній стадії захворювання, кількість CD4+ лімфоцитів зазвичай перевищує 0,5. 109/л, що відповідає значенням здорових людей.

Первинний етап (скринінг) дослідження на ВІЛ.

Увага! При здачі дослідження АТ та АГ до ВІЛ 1/2 для первинного скринінгу дослідження відповідно до законодавства РФ обов'язково надання наступних даних та документів:

1) Для жителів Москви та Московської області

Прізвище ім'я по батькові
День, місяць та рік народження
Відомості про реєстрацію
Паспорт
Страховий поліс (серія та номер страхового полісу, найменування страхової компанії).

2) Для мешканців інших регіонів РФ та іноземних громадян додатково – ксерокопію (скан) паспорта.

Прізвище ім'я по батькові
День, місяць та рік народження
Відомості про реєстрацію
Страховий поліс (серія та номер страхового поліса, найменування страхової компанії)
Ксерокопія (скан) паспорта

У разі не надання зазначеної вище інформації, для пацієнтів з попередніми позитивними та сумнівними результатами скринінг дослідження АТ та АГ до ВІЛ ½ (скринінг) (кач.), результат дослідження не може бути виданий.

Аналіз можна здати анонімно: при цьому пацієнт реєструється як анонім з індивідуальним номером замовлення (п.2, ст.8 ФЗ РФ № 38-ФЗ), за обов'язкового вказівки року народження та місця проживання (суб'єкт РФ).

Звертаємо Вашу увагу! Що результати первинного (скринінг) дослідження є лише результатами лабораторного дослідження та не є результатом огляду чи висновком про наявність чи відсутність ВІЛ-інфекції. За результатами скринінгу дослідження слід звернутися до муніципального центру-спіду для проведення добровільного огляду на наявність ВІЛ.

Результати дослідження на ВІЛ незалежно від їх результату видаються лише за особистого звернення пацієнта до лабораторного відділення. Під час обстеження неповнолітніх (до 14 років) дітей – законного представника, зазначеного у замовленні.

Результати видаються за умови пред'явлення договору, кошторису та документа, що засвідчує особу самого пацієнта або представника пацієнта, зазначеного у замовленні.

По телефону та електронній поштірезультатів досліджень не повідомляються.

За допомогою даного тесту досліджувані зразки сироватки/плазми крові можна одночасно протестувати на наявність антигену ВІЛ 1 та 2 типів та антитіл до ВІЛ 1 та 2 типу.

Вірус імунодефіциту людини відноситься до сімейства РНК-ретровірусів, що містять, і підродини лентивірусів, тобто. віруси повільних інфекцій. ВІЛ генетично та антигенно неоднорідний, за своєю структурою поділяється на 1 та 2 тип. При впровадженні в клітини людини вірус утворює в їхньому геномі ділянку ДНК, яка надалі утворює нові ВІЛ у необмеженій кількості. На поверхні ушкоджених клітин з'являються антигени вірусу. Відповіддю з їхньої появу з боку імунної системи є утворення специфічних антитіл до вірусу першого чи другого типу. За останні три роки кількість офіційно зареєстрованих у Росії ВІЛ-інфікованих осіб зростає у геометричній прогресії. Стрімке поширення ВІЛ-інфекції в країні може набути неконтрольованого характеру. Тому однією з головних завдань в даний час є використання більш досконалих методів її діагностики, що забезпечують виявлення заражених осіб на ранніх стадіях інфекції. До таких методів відносяться серологічні лабораторні тести, що визначають як білкові структури вірусу, так специфічні антитіла до вірусу.

Діагностика вірусу імунодефіциту провадиться кількома методами. За потреби її проводять у кілька етапів. Починається вона з імуноферментного аналізу. Його виробляють у поліклініках та безкоштовних лабораторіях. За результатами дослідження пацієнта направляють на додаткову діагностику. Результати аналізів уміщаються на одній сторінці, але їх розшифровка не завжди може бути зрозуміла пацієнтові. Антитіла до ВІЛ не виявлено чи виявлено. Що це означає? Як зрозуміти результат аналізу вірусу імунодефіциту?

Що означає, що антитіл ВІЛ не виявлено чи негативний результат?

Перший аналіз, на який направляють пацієнта з підозрою на вірус імунодефіциту, – це ІФА-тестування. Цей аналіз здатний виявити антитіла до вірусу імунодефіциту. Що означає, антитіла до ВІЛ не виявлені – питання, яке цікавить багатьох. Отримуючи на руки бланк з негативним результатом люди нерідко не отримують відповіді на головне питання. Йдеться про те, чи можна сміливо відмістити цей діагноз чи загроза інфікування все ж таки є? Якщо антитіла до ВІЛ не виявлено, що це означає? У більшості випадків негативний результат означає те, що людина здорова. При цьому важливим є дотримання певних умов перевірки. Про що конкретно йдеться? Кров слід здавати натще. А саму процедуру перевірки важливо провести у встановлені фахівцями медицини терміни після зараження. «Антитіла до ВІЛ негативно» — саме так може значитися на бланку з результатом аналізу, якщо здати його через кілька днів або тижнів після передбачуваного зараження. Антитіла до ВІЛ не будуть виявлені до того моменту, як в організмі хворого відбудеться сероконверсія. Тільки після того, як їхня кількість досягне певної межі, імуноферментний аналіз зможе їх показати. У деяких випадках самі пацієнти першим здають не ІФА-тестування, а імунний блот. Як правило, такий аналіз проводиться у платних клініках. Бюджетна медицина застосовує його для підтвердження чи спростування результатів ІФА. АГ та АТ до ВІЛ не виявлено – таке формулювання може бути результатом імунного блоттингу. Вона означає, що вірус імунодефіциту відсутня в організмі. Однак лише в тому випадку, якщо було дотримано умов перевірки. Йдеться насамперед про терміни перевірки на СНІД.

Якщо у бланку з результатами аналізу буде значитися таке формулювання: ВІЛ 1,2 антиген, антитіла негативний, значить вірус імунодефіциту також відсутній. Цифри у цьому формулюванні означають те, що проводився якісний аналіз. Тобто пацієнта перевіряли не тільки щодо наявності або відсутності вірусу, а й перевіряли його тип. Якщо антигени та антитіла до ВІЛ 1,2 негативні, значить, людина здорова і боятися їй нічого.

Позитивні антитіла до ВІЛ: що це означає?

Якщо антитіла та антигени до ВІЛ не виявлені, турбуватися нема про що. Що чекає на людину з позитивним результатом аналізу. Варто зазначити, що наявність у сироватці крові антитіл до вірусу імунодефіциту ще не діагноз. Імуноферментного аналізу, спрямованого на їх виявлення, недостатньо для того, щоб поставити діагноз. Адже існують різні патології, а також стан організму, при яких у крові починається вироблення АТ до вірусу імунодефіциту. Йдеться про проблеми з нирками (деякі захворювання на термінальній стадії), імунною системою або щитовидною залозою. Якщо антитіла до ВІЛ відсутні, це ще не означає, що з переліченими вище органами і системами людського організму проблем немає. Все індивідуально і залежить від особливостей фізіології та стану конкретної людини.

Антиген до ВІЛ – негативний, антитіла – позитивний, що це означає? Це означає, що такий діагноз, як вірус імунодефіциту людини, не встановлено. Тут слід пояснити, що за допомогою імуноферментного аналізу виявляються здорові та сумнівні пацієнти. І якщо антитіла, які виявлені за допомогою ІФА, не вступають у реакцію зі штучним білком вірусу імунодефіциту, отже, людина здорова.

Антитіл до ВІЛ немає, позитивний антиген, що це означає і чи буває таке? Відразу варто відзначити, що цей розвиток подій можливий, особливо в тому випадку, якщо перевірка АТ показала негативний результат, а симптоми ранніх проявів імунодефіциту вірусу у людини присутні. У цьому випадку лікар може запідозрити лабораторну або адміністративну помилку та направити пацієнта на більш чутливе та точне дослідження – імунний блот. Варто зазначити, що такі ситуації є вкрай рідкісними. У більшості випадків перевіряти ще раз результати імуноферментного аналізу не доводиться. При цьому вкрай важливо дотримуватися термінів та умов перевірки.

ВІЛ-інфекція - захворювання, що викликається вірусом імунодефіциту людини (ВІЛ), який тривалий час персистує в лімфоцитах, макрофагах, клітинах нервової тканини, внаслідок чого розвивається повільно прогресуюче ураження імунної та нервової системорганізму, що виявляється вторинними інфекціями, пухлинами, підгострим енцефалітом та іншими патологічними змінами. Збудники - віруси імунодефіциту людини 1-го та 2-го типів - ВІЛ-1, ВІЛ-2 (HIV-I, HIV-2, Human Immunodeficiency Virus, types I, II) - відносяться до сімейства ретровірусів, підродини повільних вірусів. Вірусна частка має сферичну форму діаметром 100-140 нм із зовнішньою фосфоліпідною оболонкою, що включає глікопротеїни (структурні білки) з певною молекулярною масою, що вимірюється в кілодальтонах. У ВІЛ-1 це 160 gp, 120 gp, 41 gp. р25, р55). Виявлення антитіл (АТ) до вірусу імунодефіциту людини є основним методом лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції. В основі методу лежить ІФА (чутливість – понад 99,5%, специфічність – понад 99,8%). Також для діагностики ВІЛ-інфекції застосовується визначення антигену (Аг) p24 методом ІФА.

Для достовірної оцінки результату обстеження на ВІЛ слід пам'ятати, що вона залежить від часу, що минув від потенційного зараження:

тест на ВІЛ-інфекцію, виконаний безпосередньо після потенційного зараження, не є інформативним, оскільки антитіла до ВІЛ ще не утворилися. Тому виконання тесту доцільно не раніше 3-го тижня після потенційного контакту з вірусом. Виняток становлять юридичні підстави (наприклад, у медичних працівників при травмі голкою, що містить біологічний матеріал), коли необхідно переконатися, що на момент контакту з потенційним носієм ВІЛ-інфекції вона у пацієнта була відсутня;
із достатньою точністю ВІЛ-інфекцію можна виключити лише через 3 місяці після потенційного зараження. Тому після контакту з носієм інфекції обов'язковим є виконання контрольного обстеження. Тим не менш, повторне виконання аналізу через 3 місяці (тобто через 6 місяців після потенційного зараження) має сенс лише у виняткових випадках, наприклад, за наявності клінічної підозри на гострий ретровірусний синдром;
негативний результат тесту є надійним тільки в тому випадку, якщо протягом трьох місяців був відсутній повторний контакт з вірусом.

За наявності клінічної підозри на гостру ВІЛ-інфекцію (гострий ретровірусний синдром, контакт групи ризику з ВІЛ-інфікованою людиною) є доцільним виконання ВІЛ-ПЛР. З урахуванням можливого помилково-негативного результату, у загальних випадках ВІЛ-ПЛР може використовуватися для виключення факту передачі ВІЛ-інфекції, проте лише умовно — вона не може замінити серологічний аналіз на ВІЛ. Тому метод ВІЛ-ПЛР повинен застосовуватися лише на додаток до серологічного аналізу, але не замість нього. Метод ВІЛ-ПЛР, який використовується у рутинній клінічній практиці, дозволяє визначати виключно ВІЛ-1.

У ряді випадків проводять експрес-тести на ВІЛ-інфекцію. Ці тести дають швидкий результат і прості у використанні, для їх виконання та оцінки результатів не потрібне застосування спеціальних приладів, тому експрес-тести можуть застосовуватись безпосередньо на місці надання допомоги. Як матеріал для дослідження, поряд з плазмою та сироваткою крові, може використовуватися також цільна або капілярна кров (з пальця або мочки вуха), яка не потребує центрифугування. Деякі тест-системи дозволяють використовувати сечу або транссудат слизової оболонки ротової порожнини. Тест показує результат уже за 15-30 хвилин. Експрес-тести особливо підходять для ситуацій, коли результат тесту спричиняє безпосередні наслідки. Наприклад, це стосується таких ситуацій, як екстрені операції або травма голкою, що містить біологічний матеріал. При використанні даного тесту існують обмеження щодо діагностики ВІЛ-інфекції до сероконверсії, оскільки майже всі наявні експрес-тести дозволяють визначати тільки антитіла до ВІЛ, але не антиген p24. Експрес-тести повинні використовуватись тільки для первинної орієнтовної оцінки. Вони не підходять для підтвердження чи виключення гострої інфекції. Результат експрес-тесту повинен бути підтверджений при першій же нагоді в ході рутинного лабораторного дослідження з використанням стандартного аналізу на ВІЛ.

Показання для призначення аналізу крові на ВІЛ

Підготовка до здачі аналізу

Головна умова для здачі аналізу – відмова від їжі щонайменше за 8 годин до процедури, а також заборона на алкоголь.

Як проводиться процедура?

Забір крові здійснюється амбулаторно за стандартною технологією - із вени стерильним шприцом. Для дослідження достатньо 5мл.

Антитіла до вірусу імунодефіциту людини у крові

У разі інфікування ВІЛ продукція антитіл починається не раніше як за два тижні.

Антиген р24 у сироватці крові

Антиген p24 може визначатись приблизно за 5 днів до первинної появи специфічних антитіл. Аг р24 – білок стінки нуклеотиду ВІЛ. Стадія первинних проявів після інфікування ВІЛ – наслідок початку реплікативного процесу.

Розшифровка результату аналізу

Через 4 тижні після зараження ВІЛ-специфічні антитіла визначаються у 60-65 % випадків, через 6 тижнів – у 80 % випадків, через 8 тижнів – у 90 % випадків, через 12 тижнів – у 95 % випадків. У стадії СНІДу кількість АТ може знижуватися до повного зникнення. При отриманні позитивної відповіді (виявленні АТ до ВІЛ), щоб уникнути хибнопозитивних результатів, аналіз необхідно повторити ще один або два рази, бажано з використанням діагностикуму іншої серії. Результат вважають позитивним, якщо з двох – в обох аналізах або з трьох – у двох аналізах чітко виявлено АТ.

Аг р24 з'являється в крові через 2 тижні після інфікування та може бути виявлений методом ІФА в період від 2 до 8 тижнів. Через 2 місяці з початку інфікування Аг р24 зникає з крові. Надалі у клінічному перебігу ВІЛ-інфекції відзначають другий підйом вмісту у крові білка р24. Він посідає період формування СНІД. Існуючі тест-системи ІФА для детекції Аг р24 використовують для раннього виявлення ВІЛ у донорів крові та дітей, визначення прогнозу перебігу захворювання та контролю за терапією. Метод ІФА має високу аналітичну чутливість, що дозволяє виявляти Аг р24 ВІЛ-1 у сироватці крові в концентраціях 5-10 пкг/мл і менше 0,5 нг/мл ВІЛ-2, та специфічністю. Разом з тим слід зазначити, що вміст Аг р24 в крові схильний до індивідуальних варіацій, що дозволяє виявити лише 20-30% пацієнтів за допомогою цього дослідження в ранній період після інфікування.

АТ до Аг р24 класів IgM та IgG у крові з'являються, починаючи з 2-го тижня, досягають піку протягом 2-4 тижнів і тримаються на такому рівні різний час- АТ класу IgM протягом кількох місяців, зникаючи протягом року після інфікування, а АТ IgG можуть зберігатися роками.

Норми

АТ до ВІЛ 1/2 у сироватці крові в нормі відсутні.
Антиген р24 у сироватці в нормі відсутній.

Захворювання, за яких лікар може призначити аналіз крові на ВІЛ

СНІД
У стадії СНІДу кількість АТ може знижуватися до повного зникнення. На період формування СНІД відзначається зростання вмісту в крові білка р24.

Первинний етап (скринінг) дослідження на ВІЛ.

1) Для жителів Москви та Московської області

Прізвище ім'я по батькові
День, місяць та рік народження
Відомості про реєстрацію
Паспорт

2) Для мешканців інших регіонів РФ та іноземних громадян додатково – ксерокопію (скан) паспорта.

Прізвище ім'я по батькові
День, місяць та рік народження
Відомості про реєстрацію
Паспорт

Телефоном та електронною поштою результати досліджень не повідомляються.

Показання до призначення дослідження

1. Збільшення лімфатичних вузлів більше двох областей;
2. Лейкопенія з лімфопенією;
3. Нічна пітливість;
4. Різке схуднення неясної причини;
5. Діарея понад три тижні неясної причини;
6. Гарячка неясної причини;
7. Планування вагітності;
8. Передопераційна підготовка, госпіталізація;
9. Виявлення наступних інфекцій або їх поєднань: туберкульоз, маніфестний токсоплазмоз, герпесвірусна інфекція, що часто рецидивує, кандидоз внутрішніх органів, повторні невралгії герпес-zoster, викликана мікоплазмами, пневмоцистою або легіонелами пневмо;
10. Саркома Капоші у молодому віці;
11. Випадкові статеві контакти.

Підготовка до дослідження

Кров рекомендується здавати вранці, у період з 8 до 11 години, натще (між останнім прийомом їжі та взяттям крові має пройти не менше 8-ми годин, воду можна пити у звичайному режимі), напередодні дослідження – легка вечеря з обмеженням прийому жирної їжі.
За 1-2 години до здачі крові утриматися від куріння, не вживати сік, чай, каву, можна пити негазовану воду. Виключити фізичну напругу (біг, швидке піднесення сходами), емоційне збудження. За 15 хвилин до здавання крові рекомендується відпочити, заспокоїтися.